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酶解法.酶解法通过利用几丁质酶、纤维素酶或溶壁酶等酶液的一种或多种,使灵芝抱子细胞壁中的成分降解,释放其有效成分.使用生物酶辅助提取灵芝酸A,终实现灵芝酸A的提取率达到0.54%. 溶菌法.利用微生物和灵芝抱子一同发酵,让微生物在发酵过程中降解灵芝抱子细胞壁.利用益生菌枯草芽抱杆菌、嗜酸乳杆菌与灵芝抱子进行液态发酵,终使得灵芝抱子破壁率达到85%以上.化学法化学法的优点与生物法较为相似;缺点是提取溶剂易导致有效成分变性,且溶剂残留不易去除.溶剂提取法.溶剂提取法利用“相似相溶”原理,使灵芝抱子在水、乙醇等溶剂中长时间浸泡或回流,从而使有效成分扩散到溶剂中.例如,Lee等8采用25%乙醇提取灵芝中的成分,终减压浓缩并定容至500mL保存,通过灵芝的25%乙醇提取物,研究其通过Nrf2/HO-1通路增强细胞的抗氧化作用,该方法对灵芝孢子的提取率较好.
我国是世界上三大锻木(原木)灵芝产区之一(另有韩国、日本),产量占世界总产量的50%以上。浙江从1989年开始灵芝人工栽培试验并取得成功,1992年农民利用纯锻木仿生法大规模栽培灵芝,产业化经营至2007年,平均每年锻木投放量3000立方米(高时达7000立方米),年产干灵芝150吨,占全国总量的四分之一。2008年以来浙江省中药产业协会将灵芝重点扶持产业,市场上灵芝产品越来越多,包括灵芝子实体、抱子粉、菌丝体为主要成分的和药品,广泛应用于肿瘤、冠心病、心绞痛、高脂血症、高血压病、、慢性支气管炎和哮喘、神经衰弱、肝炎等。但国内外灵芝药材及其产品均无系统的质量控制体系,对灵芝及其产品质量的控制大多都停留在主要活性成分定性评价的水平上,灵芝品种使用也是几十年一成不变,单一品种的重复使用,菌种种性退化明显,与“、有效、稳定、可控叩勺中药现代化、国际化要求存在相当差距,建立灵芝功效成分定性与定量结合的评价方法,控制灵芝及其产品质量,对灵芝产业可持续发展具有重要意义。
用750g、口径4cm的瓶,也可采用广口瓶或罐头瓶。拌料装瓶主料与辅料等先拌匀,把糖溶于水中而后逐渐加入料中并充分拌匀,每100kg干料加水140?160kg,以手紧握料指缝中有少量水滴下为宜。采用徒手或装瓶机分装,要求松紧适中,直至离瓶口1cm处,压平,中央用捣木打孔至瓶底,洗净瓶口、瓶壁污物,瓶口用牛皮纸包好。灭菌接种常压100兀灭菌,持续8?12h,高压灭菌121兀,保持1.5h。待冷却后,在无菌条件下接入菌种。然后放到培养室,控制温度25兀,室内相对湿度控制在70%以下。培养室内保持黑暗状态,以利菌丝生长。一般经20d发菌培养,当菌丝长至1/2瓶时,可以除去封口纸,搬至于实体发生室。此时控温25兀?28兀,相对湿度增至90%~95%,保持空气清新,增强漫射光。菌盖不断生长,直至四周白色生长圈消失,即停止生长扩大,但仍可继续加厚。子实体形成菌管,弹射出红褐色孢子。
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